文章摘要:目的 探讨转录因子叉头框蛋白O3a（FOXO3a）对前列腺癌细胞上皮间质转化（EMT）的影响及其作用机制。方法采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测正常前列腺上皮细胞RWPE-1和前列腺癌细胞LNCaP、DUl45、PC-3中FOXO3a表达水平，选择FOXO3a表达最低的前列腺癌细胞系转染pcDNA-FOXO3a、pcDNA-NC构建FOXO3a过表达细胞系（pc-FOXO3a）和阴性对照（NC），采用MTT法、流式细胞法检测细胞活性和凋亡情况，Transwell试验、划痕试验检测细胞侵袭和迁移能力，蛋白质印迹法（Western blotting）检测钙黏附蛋白E（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、神经型钙黏附蛋白（N-cadherin）、Snail、cMyc、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、剪切型胱天蛋白酶-3（Cleaved-Cas-3）、Bcl-2相关X（Bax）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、β-连环蛋白（β-catenin）、Wnt1水平。运用氯化锂（Wnt/β-catenin信号通路激活剂）作用于pcDNA-FOXO3a前列腺细胞，分析细胞活性、凋亡和上皮间质转换（EMT）情况。结果 LNCaP、DUl45、PC-3细胞中FOXO3a表达水平均显著低于RWPE-1细胞[（0.23±0.04）、（0.53±0.05）、（0.42±0.06）比（1.02±0.08）]（P<0.05），其中LNCaP细胞中FOXO3a表达水平最低。pc-FOXO3a LNCaP细胞活性、单个视野细胞侵袭数目、划痕迁移率显著低于NC LNCaP细胞（P<0.05），细胞凋亡率显著高于NC LNCaP细胞（P<0.05）;pc-FOXO3a LNCaP细胞N-cadherin、Vimentin、Snail、β-catenin、c-Myc、cyclin D1、Bcl-2、Wnt1水平显著低于NC LNCaP细胞（P<0.05），而E-cadherin、Cleaved-Cas-3、Bax水平显著高于NC LNCaP细胞（P<0.05）。LiCl-pc-FOXO3a LNCaP细胞活性、单个视野细胞侵袭数目、划痕迁移率、N-cadherin、Vimentin、Snail水平显著高于LiCl-pc-FOXO3a-Ctrl LNCaP细胞（P<0.05），细胞凋亡率、E-cadherin水平显著低于LiCl-pc-FOXO3a-Ctrl LNCaP细胞（P<0.05）。结论 FOXO3a表达升高可降低前列腺癌细胞活性、促进细胞凋亡，抑制细胞EMT，可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。

文章关键词:

论文分类号:R737.25